タンパク質および核酸の転写検出に使用される転写メンブレンの最も一般的な 3 つのタイプは、ニトロセルロース メンブレン、ポリフッ化ビニリデン (PVDF) メンブレン、およびナイロン メンブレンです。ニトロセルロース膜は、高いタンパク質結合親和性とさまざまな検出方法との互換性により、タンパク質ブロッティングで一般的に使用されるマトリックスです。ニトロセルロース膜のタンパク質結合能力は 80 ～ 100 µg/cm2 で、タンパク質の固定化は主に疎水性相互作用によって起こります。ニトロセルロース膜は脆くて壊れやすいため、標識解除や再標識への使用は制限されています。
ポリフッ化ビニリデン (PVDF) 膜は、タンパク質と核酸の両方に対して高い結合親和性を持っています。 PVDF メンブレンは疎水性が高いため、転写バッファーに浸す前にメタノールまたはエタノールであらかじめ湿らせる必要があります。- PVDF 膜のタンパク質結合能力は 170 ～ 200 µg/cm2 です。ニトロセルロースと比較して、PVDF メンブレンは脆性や脆弱性が少なく、機械的強度と化学的安定性に優れており、標識解除と再標識の手順を必要とするウェスタンブロッティング実験に適しています。 PVDF 膜は疎水性があるため、疎水性タンパク質としては最適な選択肢です。
ナイロン膜は、イオン性、静電性、疎水性の相互作用を通じてタンパク質と核酸を結合します。ナイロン膜のタンパク質結合能力は 480 µg/cm2 に達します。ナイロンメンブレンは高い耐久性を示し、標識解除および再標識手順が必要なウェスタンブロッティング実験に利点をもたらします。ナイロン膜をブロッティング用途に使用する場合の重大な欠点は、アニオンとの非特異的結合が発生する可能性があることです。-